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                簡要描述:FastPfu DNA polymerase 酶:高保真DNA聚合酶,擴增速度2-4kb/min

                瀏覽量: 62

                所屬分類:酶

                更新日期:2020-07-28

                廠商性質:經銷商

                詳情介紹
                品牌自營品牌規格100/500/100U
                供貨周期現貨主要用途PCR擴增
                應用領域生物產業

                FastPfu DNA polymerase 酶

                產品應置于-20 保存。

                產品質控

                1)性能檢測 1

                50 μL PCR 反應體系加入 1 U FastPfu DNA Polymerase、100 ng Human RP11 13M9-pBACe3.6 質粒,

                擴增 15 kb DNA 目的片段,在 30 個循環擴增后經 1%瓊脂糖凝膠檢測可在 15 kb 處檢測到較亮的單一目

                的條帶。

                2)性能檢測 2

                50 μL PCR 反應體系加入 1 U FastPfu DNA Polymerase、大腸桿菌菌落,擴增 5 kb DNA 目的片

                段,在 30 個循環擴增后經 1%瓊脂糖凝膠檢測可在 5 kb 處檢測到較亮的單一目的條帶。

                3)大腸桿菌核酸殘留檢測:

                20 μL 熒光定量 PCR 反應體系加入 1 U FastPfu DNA Polymerase 和大腸桿菌特異基因擴增引物(如

                gapA);在不加入大腸桿菌 DNA 模板的情況下,20 個循環內熒光信號值在基線范圍。

                 

                 FastPfu DNA polymerase 酶

                常規 PCR 反應體系: 

                1. 在冰浴上設置 PCR 反應(供參考)*

                模板:                     < 500 ng

                2× FastPfu Buffer:   25 μL

                Primer 1/2:               0.2 - 1.0 μM

                dNTPs (10 mM):     1 μL

                FastPfu:                  1 μL

                滅菌蒸餾水 Up to 50 μL

                 

                2. PCR 反應參數(供參考)**

                (起始變性): 95 ℃ 5 min

                (解鏈): 98 5 sec

                (退火): 55 ℃ 30 sec

                (延伸): 72 ℃ x min 30-35 循環:2 kb/min

                (終延伸): 72 ℃ 7 min

                 

                * 針對不同類型的模板,所需的模板量會有不同,如基因組和質粒,等等;需要根據實際情況,添加合適的模

                板量;** 退火溫度需根據引物和模板實際的 G+C 含量來作調整



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